在神經(jīng)科學(xué)、藥理學(xué)及新藥研發(fā)領(lǐng)域,冷熱板測(cè)痛儀被譽(yù)為評(píng)估動(dòng)物痛覺反應(yīng)的“痛感衡器”,廣泛用于研究鎮(zhèn)痛藥物療效、疼痛機(jī)制及中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能。該儀器通過精確控制金屬板溫度(通常可調(diào)范圍為5℃~55℃),觀察小鼠、大鼠等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在冷或熱刺激下的行為反應(yīng)(如舔足、抬足、跳躍),從而量化其痛閾值。為確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的科學(xué)性、可重復(fù)性與動(dòng)物福利,冷熱板測(cè)痛儀必須遵循規(guī)范的操作流程。
第一步:儀器準(zhǔn)備與環(huán)境校準(zhǔn)
將測(cè)痛儀放置于安靜、光線柔和、無強(qiáng)氣流干擾的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)。開機(jī)預(yù)熱15~30分鐘,使加熱/制冷系統(tǒng)穩(wěn)定。使用標(biāo)準(zhǔn)溫度計(jì)或校準(zhǔn)探頭驗(yàn)證板面實(shí)際溫度與設(shè)定值的一致性,誤差應(yīng)控制在±0.5℃以內(nèi)。
第二步:設(shè)定測(cè)試溫度
根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康脑O(shè)定恒定溫度:
熱板試驗(yàn):常用52℃、55℃模擬熱痛刺激;
冷板試驗(yàn):可設(shè)為4℃、10℃用于冷痛敏感性研究。
開啟溫度穩(wěn)定提示功能,確保平臺(tái)達(dá)到設(shè)定值并保持恒定。
第三步:動(dòng)物適應(yīng)性訓(xùn)練
實(shí)驗(yàn)前1~2天,讓動(dòng)物在測(cè)試環(huán)境中適應(yīng)至少30分鐘,減少應(yīng)激反應(yīng)。可進(jìn)行1~2次無刺激預(yù)訓(xùn)練,使其熟悉儀器外觀與操作流程,提高測(cè)試配合度。
第四步:開始測(cè)試與行為觀察
將動(dòng)物輕柔放入透明觀察箱內(nèi),置于恒溫板上,避免驚嚇。啟動(dòng)計(jì)時(shí)器,觀察其行為反應(yīng)。以出現(xiàn)舔后足、抬起或甩動(dòng)肢體的時(shí)間作為“痛反應(yīng)潛伏期”,設(shè)定時(shí)間(如30秒),防止組織損傷。
第五步:數(shù)據(jù)記錄與防誤差措施
由兩名以上實(shí)驗(yàn)人員盲法記錄數(shù)據(jù),減少主觀偏差。每次測(cè)試后清潔板面,用75%酒精擦拭消毒,避免氣味殘留影響下一只動(dòng)物。每只動(dòng)物間隔至少15分鐘,防止痛覺敏化。
第六步:實(shí)驗(yàn)結(jié)束與設(shè)備維護(hù)
測(cè)試完成后,將儀器溫度調(diào)回室溫,關(guān)閉電源。定期檢查加熱/制冷模塊、溫度傳感器及透明罩完整性,確保設(shè)備長(zhǎng)期穩(wěn)定運(yùn)行。